甘油葡萄糖苷主要来源有生物合成法、化学合成法、酶催化合成法。

1、化学合成法：根据文献报道，高碘酸钠和硼氢化钠催化麦芽糖醇可以合成2-αGG；乙酸、四乙酸铅和硼氢化钠催化异麦芽糖可以合成2S-1-αGG，四乙酸铅可以催化乙二醇和海藻糖生成2S-1-αGG 和2R-1-αGG。

2、酶催化法：α-葡萄糖苷酶催化麦芽糖和甘油可生成甘油葡萄糖苷，但产物为多种构型混合物，分离纯化困难，使用来源于明串珠菌属的蔗糖磷酸化酶可以催化蔗糖和甘油合成2-αGG，但是这种酶活性较低，因此限制了该方法的使用。还有研究发现，一种来源于芽孢杆菌的甘油葡萄糖苷磷酸化酶可以催化β-D-葡萄糖1-磷酸和甘油生成2-αGG，但这两种方式产率较低。

3、生物合成法：一些种类的异养型假单胞菌及蓝藻在特定条件下会合成2-αGG，一些高等植物如南非重生草可在体内合成2-βGG。但是生物合成法因为生产成本较高、产品产率低等原因，多处于起步阶段。